Keluarga Gambino adalah keluarga kriminal Mafia Italia-Amerika yang berdiri setelah Perang Castellammarese tahun 1931.
Bahkan mereka juga salah satu dari "Lima Keluarga" yang mendominasi aktivitas kejahatan terorganisir di Kota New York, Amerika Serikat.
Karena sering terlibat dalam fenomena kriminal nasional, maka keluarga Gambino dikenal sebagai Mafia Amerika.
Pada 1963, struktur kejahatan terorganisir keluarga kriminal ini pertama kali mendapat perhatian publik.
Operasi kelompok mafia tersebut meluas dari New York dan pesisir timur ke California.
Kegiatan terlarangnya meliputi tenaga kerja dan pemerasan konstruksi, perjudian, lintah darat, pemerasan, pencucian uang, prostitusi, penipuan, pembajakan, dan pemagaran.
Keluarga kriminal ini punya 5 bos mafia antara tahun 1910 dan 1957. Mulai dari Carlo Gambino hingga Albert Anastasia.
Namun dari semua itu, John Joseph Gotti Jr. atau yang akrab disapai John Gotti Jr adalah bos dari keluarga kriminal Gambino yang paling terkenal.
Lahir dalam kemiskinan, dia dan saudara laki-lakinya beralih ke kehidupan kriminal sejak usia dini.
Gotti dengan cepat menjadi salah satu pencari nafkah terbesar keluarga kriminal dan anak didik Aniello Dellacroce, underboss keluarga Gambino, yang beroperasi di sekitar Ozone Park di Queens.
Menyusul dakwaan FBI terhadap anggota kru Gotti karena menjual narkotika, Gotti mulai takut dia dan saudaranya akan dibunuh oleh Castellano karena mengedarkan narkoba.
Saat ketakutan ini terus tumbuh, dan di tengah meningkatnya perbedaan pendapat atas kepemimpinan keluarga kriminal, Gotti mengatur pembunuhan Castellano.
Pada akhirnya dia mengambil alih keluarga kriminal Gambino setelah memerintahkan pembunuhan terhadap bos Gambino Paul Castellano pada Desember 1985.